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苦基磺酸 溶液

簡要描述:Sigma-Aldrich 苦基磺酸 溶液 Picrylsulfonic acid solution / 2,4,6-Trinitrobenzenesulfonic acid solution (TNBS)產品說明書

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2026-04-22
  • 訪  問  量:7783

詳細介紹

品牌Sigma-AldrichCAS2508-19-2
分子式C?H?N?O?S分子量293.17
貨號P2297規格10ML
供貨周期現貨應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥,綜合

一、 產品描述

• 中文命名:苦基磺酸 溶液

• 英文命名:Picrylsulfonic acid solution / 2,4,6-Trinitrobenzenesulfonic acid solution (TNBS)

• 貨號:P2297

• 產品品牌:Sigma-Aldrich

• 產品級別:BioReagent(生物級試劑,滿足高標準的生化實驗需求)

• 物質純度/濃度:5 % (w/v) 水溶液(即每100mL溶液中含有5g苦基磺酸)

• 物理形態:液態(常溫下為澄清至微渾濁的黃色液體)

• 經驗分子式:C?H?N?O?S

• 主要應用:專用于光譜法定量測定伯胺(Primary amines),同時也可作為親水改性劑及多肽合成中的氨基酸保護基修飾試劑。


二、 產品核心特點

1. 優秀的檢測靈敏度與特異性

  苦基磺酸 溶液作為一種經典的胺類檢測探針,能夠與伯胺基團發生高效、特異的親核芳香取代反應。其反應產物在特定的紫外可見光區域(通常在340nm或420nm附近,取決于具體的緩沖體系和pH環境)具有強烈的吸收峰,從而實現對痕量伯胺物質的精準定量檢測。

2. 高品質生化級(BioReagent)標準

  作為Sigma-Aldrich旗下的高等級生化試劑,該產品經過了嚴格的質量控制和純度篩選,確保極低的雜質干擾。其批次間穩定性高,能夠滿足從基礎教學實驗到前沿生命科學研究的各種嚴苛要求。

3. 預配制的即用型水溶液

  苦基磺酸(TNBS)純品在干燥狀態下具有一定的爆炸危險性,且在水中的溶解度有限。本產品將其預先配制為5% (w/v) 的穩定水溶液,不僅極大地提升了實驗操作的安全性,還免去了實驗人員自行繁瑣配制的步驟,開瓶即可使用,顯著提高了實驗室的工作效率。

4. 廣泛的應用兼容性

  除了作為經典的伯胺定量試劑外,由于其分子結構中含有強吸電子的硝基基團,使其苯環極易受到親核進攻,因此在有機合成、高分子材料改性(如作為親水改性劑接枝聚合物表面)以及免疫學動物模型構建(如TNBS誘導的結腸炎模型)中均有重要應用。


三、 儲存與運輸條件

• 短期儲存(日常):建議在 2℃ 至 8℃ 的避光環境下密封儲存。在此條件下,產品可保持穩定至少五個月且分解率低于5%。

• 長期儲存:若需延長保存期限,建議分裝后置于 -20℃ 冷凍保存,可有效保持試劑的長期活性與穩定性。

• 避光要求:該試劑對光線較為敏感,見光易發生分解產生Picric acid等雜質,因此全程避光(如存放于棕色試劑瓶或用鋁箔紙包裹)對于維持其化學性質至關重要。

• 運輸條件:常溫運輸即可,但收到貨物后應立即按規定溫度儲存。

• 安全警示:雖然本品為穩定的水溶液,但仍屬于含能材料衍生物。嚴禁在開口容器中加熱至干,干燥后的殘留物具有高的爆炸性。所有使用過的容器和廢棄物必須按照危險化學品的處理規范進行專門處置。


四、 工作原理與反應機制

苦基磺酸(TNBS)在定量分析伯胺(如氨基酸、多肽、蛋白質中的N端α-氨基或賴氨酸殘基的ε-氨基)時,其核心工作機制基于 親核芳香取代反應(Nucleophilic Aromatic Substitution, S_N2)。

1. 反應觸發:在弱堿性(通常pH 8.0 - 9.0)的緩沖體系中,伯胺(R-NH?)分子中的氮原子由于帶有孤對電子,表現出強烈的親核性。

2. 親核進攻:伯胺基團向TNBS分子中電子云密度較低的苯環碳原子(通常是連接磺酸基的對位)發起親核進攻,形成一個帶負電荷的 Meisenheimer 絡合物(σ-絡合物)中間體。

3. 離去基團脫離:隨著反應的進行,作為優良離去基團的磺酸根(SO??)從苯環上脫落。

4. 產物生成:最終生成穩定的、呈橘黃色的 TNP-胺

該有色衍生物在 340 nm(酸性條件)或 420 nm(堿性條件)波長處具有最大的光吸收值。根據朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law),通過測定反應體系在特定波長下的吸光度(OD值),即可計算出未知樣品中伯胺基團的準確濃度。


五、 解決實驗中的哪些痛點與問題

在生命科學與分析化學的日常實驗中,研究人員經常面臨以下難題,而本產品能夠提供解決方案:

1. 蛋白質/多肽濃度的快速準確定量

  傳統的Lowry法或BCA法在含有高濃度去垢劑(如SDS、Triton X-100)或還原劑(如DTT、β-巰基乙醇)的樣品中會受到嚴重干擾,導致讀數偏差極大。而TNBS法則對這類干擾物質具有強的耐受性,能夠在復雜的裂解液或純化緩沖體系中依然保持對蛋白質伯胺基的精準檢測。

2. 氨基酸組成分析中的N端測定

  在多肽測序或氨基酸分析儀的前處理中,需要明確樣品中游離α-氨基的數量。TNBS可以與除了脯氨以外的所有氨基酸發生反應,是進行氨基酸定性和定量分析的經典手段。

3. 高分子材料的表面親水化改性

  對于某些本身疏水的聚合物基質,研究人員可以利用TNBS分子上的磺酸基或經過衍生化后的活性位點,將其接枝到材料表面,從而顯著改善材料的親水性能和生物相容性。

4. 免疫學炎癥模型的誘導

  在動物實驗(特別是小鼠結腸炎研究)中,TNBS常被用作半抗原(Hapten)。當其與組織蛋白結合后,能夠將自身轉化為抗原,從而誘發宿主產生遲發型超敏反應,模擬人類炎癥性腸?。↖BD)的病理過程。


六、 實驗使用方法與操作流程

為了獲得最佳且可重復的實驗結果,建議參考以下基于經典文獻優化的操作步驟進行伯胺濃度的測定:

A. 標準曲線繪制與樣品測定(以96孔板為例)

1. 試劑平衡:從冰箱(2-8℃)中取出本品,置于室溫下避光平衡30分鐘。同時準備好pH 8.5的硼酸鹽緩沖液(0.1 M)作為反應介質。

2. 制備標準品梯度:使用已知濃度的伯胺標準品(如甘氨或牛血清白蛋白 BSA),在緩沖液中稀釋出一系列濃度梯度(例如 0, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mM)。

3. 加入TNBS試劑:向每個孔中加入等體積(如100 µL)的平衡后TNBS溶液,輕柔振蕩混勻。此時溶液應呈現均勻的黃色。

4. 避光孵育:蓋上多孔板蓋,在室溫(約25℃)下避光孵育 2 小時,或在 37℃ 下避光孵育 1 小時。注意:溫度過高可能導致試劑分解,需嚴格控制。

5. 終止反應與測定:根據需要,可加入稀酸或特定終止液中止反應。隨后將多孔板放入酶標儀中,在 420 nm(或340 nm,視具體緩沖體系而定)波長下測定各孔的吸光度值(OD???)。

6. 數據處理:以標準品的濃度為橫坐標,吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。根據樣品的吸光度值,即可從標準曲線上精確查得樣品中的伯胺濃度。

B. 多肽/蛋白質N端修飾操作

1. 將目標多肽溶解于適量的緩沖液(pH 8.5)中。

2. 按多肽物質的量 5-10 倍的比例加入本品。

3. 在室溫下避光攪拌反應 2-4 小時。

4. 反應結束后,可通過凝膠過濾色譜(GFC)或透析的方法去除未反應的TNBS小分子及副產物,收集改性后的多肽產物。


七、 常見問題分析與解決方案(FAQ)

在使用本品的過程中,可能會遇到一些技術疑問,以下是針對常見問題的專業解答與排查思路:

• 問題1:溶液底部或瓶壁出現了少量黃色或無色晶體,是否還能繼續使用?

 • 原因分析:這可能是由于儲存溫度過低導致部分溶質析出,或是試劑輕微分解產生了微量的晶體。

 • 解決方案:一般情況下,這些晶體不會影響產品的核心使用性能。建議將試劑瓶取出,置于室溫下充分平衡并輕輕搖晃直至晶體全重新溶解。若需高精度,可通過0.22 µm水系濾膜過濾后使用。

• 問題2:實驗測得的吸光度值偏低或不穩定,可能的原因是什么?

 • 原因分析:可能是pH值不適宜導致反應不全;或是樣品中存在高濃度的還原性物質消耗了TNBS;亦或是孵育時間不足、光線過強導致產物分解。

 • 解決方案:務必使用pH 8.0-9.0的緩沖體系;確保反應在嚴格避光的條件下進行;適當延長避光孵育時間至過夜;檢查樣品中是否含有干擾性強的還原劑。

• 問題3:產物的特征吸收峰除了420nm,還有沒有其他選擇?

 • 原因分析:TNP-胺衍生物的紫外吸收受環境pH影響顯著。

 • 解決方案:在酸性環境(pH < 5.0)下,最大吸收峰會藍移至 340 nm 左右,而在強堿性環境(pH > 10.0)下,則會紅移至 460 nm 左右。可根據實驗室儀器的配置靈活調整測定波長。

• 問題4:廢棄的TNBS溶液應當如何處理?

 • 解決方案:切勿直接倒入下水道。應先用大量水稀釋,然后加入過量的溶液并緩慢加熱煮沸,使其分解為無毒的化合物后再行丟棄,或交由具有資質的危廢處理機構處置。


關鍵詞:Sigma-Aldrich、西格瑪奧德里奇、Sigma試劑、苦基磺酸、TNBS、P2297、伯胺測定試劑盒、生化試劑、多肽合成試劑、氨基酸分析、蛋白質定量、免疫學試劑、結腸炎模型、親水改性劑、生命科學試劑、分析純試劑、實驗室耗材、試劑、高性能生化試劑、產品說明書。


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(注:本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)


?Sigma-Aldrich熱賣產品

貨號

品名

規格

品牌

I0516-5ML

Insulin solution from bovine pancreas

5mL

Sigma-Aldrich

H0888-1G

Hydrocortisone

1g

Sigma-Aldrich

P2297-10ML

Picrylsulfonic acid solution

10mL

Sigma-Aldrich

F5881-10X10ML

弗氏佐劑

10 X 10 ML

Sigma-Aldrich

F5881-10ML

Freund’s Adjuvant, Complete

10mL

Sigma-Aldrich

MAB1285FX

Anti-HLA-B27 Antibody, clone HLA.ABC.m3, FITC conjugated

100 assays

Sigma-Aldrich

B2064-100G

Bovine Serum Albumin

100g

Sigma-Aldrich

33429-100MG-R

Doxycycline hyclate

100mg

Sigma-Aldrich

F8687-500ML

澳洲胎牛血清, 熱滅活

500ML

Sigma-Aldrich

C-141-1ML

Cannabigerol solution

1mL

Sigma-Aldrich

10109169001

RNaseA(RNASEA-RO)

100mg/瓶

Sigma-Aldrich

48914-U

ProClin™ 300

400ml

Sigma-Aldrich

10771-100ml

Histopaque®-1077

100ml

Sigma-Aldrich

239216-25mg

碳酸鈣

25mg

Sigma-Aldrich

U5128-1KG

尿素

1 kg

Sigma-Aldrich

243159-1G

(R)-3-羥基丁酸甲酯

1g

Sigma-Aldrich

M4287

Mitomycin C

2mg

Sigma-Aldrich

RECOMT-1KT

凝血 CleanCleave™ 試劑盒

1 kit

Sigma-Aldrich

M3633-250MG

4-Methylumbelliferyl β-D-glucopyranoside

250mg

Sigma-Aldrich

G9145

[Leu15]-Gastrin I human

0.5mg

Sigma-Aldrich

T5648-1G

泰莫西芬

1G

Sigma-Aldrich

P8340-5ML

Protease Inhibitor Cocktail

5ml

Sigma-Aldrich

152633

橄欖醇

1g

Sigma-Aldrich

G7641-1MG

Monosialoganglioside GM1 from bovine brain

1mg

Sigma-Aldrich

P5493-1L

磷酸鹽緩沖鹽水

1L

Sigma-Aldrich

R8758-500ml

1640培養基

500ml

Sigma-Aldrich

H7379-1G

血紅蛋白 人

1g

Sigma-Aldrich

610000-1EA

擠出器套件,帶支架/加熱塊

1 ea

Sigma-Aldrich

91077C-100MG

重組胰島素

100mg

Sigma-Aldrich

C8654

酪蛋白酸鈉

500g

Sigma-Aldrich

MR-070-D

EmbryoMax® Human Tubal Fluid (HTF) (1X), liquid, for Mouse IVF

50mL

Sigma-Aldrich

H9268-5G

Hexadimethrine bromide

5g

Sigma-Aldrich

E1250-25MG

Elastase from porcine pancreas

25mg

Sigma-Aldrich

H4522-20ML

Human Serum

20mL

Sigma-Aldrich

T8154-100ml

臺盼藍溶液 0.4%

100ml

Sigma-Aldrich

C-142-1ML

Cannabigerolic acid solution

1ml

Sigma-Aldrich

610014-1EA

漏斗架 10mm Filter Supports

100/pk

Sigma-Aldrich

17000-25G

溴乙酸 ReagentPlus®, ≥99.0%

25G

Sigma-Aldrich

T2577

Temozolomide

25MG

Sigma-Aldrich

42966-1KG

Kolliphor® HS 15

1 KG

Sigma-Aldrich

D4693

蛋白酶II

1g

Sigma-Aldrich

P5899-5MG

聚-L-賴氨酸 氫溴酸鹽

5MG

Sigma-Aldrich

363502-10G

Poly[(R)-3-hydroxybutyric acid]

10g

Sigma-Aldrich

47036-50G-F

皂素

50g

Sigma-Aldrich

I9030-100ML

2-Propanol

100ml

Sigma-Aldrich

T9281-25ML

四甲基乙二胺

25ml

Sigma-Aldrich

A3678-25G

過硫酸銨

25g

Sigma-Aldrich

C3755-500UN

肌酸磷酸激酶 來源于兔肌肉

500units

Sigma-Aldrich

G8877-10MG

鳥苷5′-三磷酸 鹽 水合物

10mg

Sigma-Aldrich

77938-100MG

3-羥基己酸甲酯

100mg

Sigma-Aldrich

PHR1359-500MG

Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material

500MG

Sigma-Aldrich

10417-5G-F

8-苯基-1-萘磺酸 銨鹽

5G

Sigma-Aldrich

A9165

N-Acetylcysteine

5g

Sigma-Aldrich

p4543-10g

丙戊酸 鹽

10g

Sigma-Aldrich

SML1195-50MG

Palonosetron 鹽酸鹽

50MG

Sigma-Aldrich

H7017-20MG

血藍蛋白 來源于大鎖孔帽貝 (透孔螺)

20MG

Sigma-Aldrich

10103578001

膠原酶A

100MG

Sigma-Aldrich

H6635-50mg

Hydrocortisone 3-(O-carboxymethyl)oxime

50mg

Sigma-Aldrich

N0636

Nicotinamide

100g

Sigma-Aldrich

L1886-25G

亮綠 SF(淡黃)

25G

Sigma-Aldrich

T8787-100ml

Triton™ X-100

100ml

Sigma-Aldrich

383694-100ml

聚丁二烯

100ml

Sigma-Aldrich

181374-100G

聚丁二烯,順式

100 G

Sigma-Aldrich

V900863-100G

明膠(來源于豬皮膚)

100g

Sigma-Aldrich

M1787-10X1ml

溶液

10X1ml

Sigma-Aldrich

HT110116-500ML

Eosin Y 醇溶液

500ML

Sigma-Aldrich

05-844

Anti-PLK1 Antibody, clone 35-206

ea

Sigma-Aldrich

SRP3201-20UG

GM-CSF 來源于小鼠

20ug

Sigma-Aldrich

A9771-50mg

Albumin–fluorescein isothiocyanate conjugate

50mg

Sigma-Aldrich

A5006-100G

L-精氨

100g

Sigma-Aldrich

F9252-500ML

Folin & Ciocalteu’s phenol reagen

500ML

Sigma-Aldrich

461091-250G

4-硝基苯甲酸

250G

Sigma-Aldrich

S1888-1kg

蔗糖

1kg

Sigma-Aldrich

Z742914-1.8kg

去污劑 ALCONOX(R) DETERGENT

1.8kg

Sigma-Aldrich

U5507-1MG

U5507-1MG

1 MG

Sigma-Aldrich

T-037-1ML

Testosterone, 1.0 mg/mL

1ml

Sigma-Aldrich

172502-100G

硫代乙酰胺

100 G

Sigma-Aldrich

274135-100ML

N,N-二甲基丙烯酰胺

100ml

Sigma-Aldrich

A8887-1KG

丙烯酰胺

1kg

Sigma-Aldrich

252859-100G

Tris Base

100g

Sigma-Aldrich

A6283-100ML

乙酸

100ml

Sigma-Aldrich

P4170

碘化丙啶

1g

Sigma-Aldrich

SML1596-5MG

PPZ2,≥98% (HPLC)

5mg

Sigma-Aldrich

RU5500

Rabies Detection Reagent - Direct Fluorescence Assay

5 mL

Sigma-Aldrich

G3272-1kG

鹽酸胍 鹽酸鹽

1kG

Sigma-Aldrich

C1988

Cycloheximide

1g

Sigma-Aldrich

A1009-1G

Albumin methylated from bovine serum

1g

Sigma-Aldrich

N2752-1G

4-硝基苯棕櫚酸酯

1g

Sigma-Aldrich

S5921-.1MG

Staurosporine from Streptomyces sp

0.1 mg

Sigma-Aldrich

F1804-50UG

單克隆抗-FLAG® M2 小鼠抗

50ug

Sigma-Aldrich

G6642-.2ML

抗 谷氨 兔抗

0.2 mL

Sigma-Aldrich

T2376

L-甲狀腺素

100mg

Sigma-Aldrich

C8052-0.5mg

實驗試劑

0.5mg

Sigma-Aldrich

G1393

Gelatin solution

100mL

Sigma-Aldrich

A4262-2mg

Actinomycin D

2mg

Sigma-Aldrich

MAK008-1KT

Hydroxyproline Assay Kit

1 kit

Sigma-Aldrich

I9278-5ML

Insulin solution human

5ML

Sigma-Aldrich

P5147-100MG

蛋白酶 來源于灰色鏈霉菌

100mg

Sigma-Aldrich

661740-1G

聚(乙烯基膦酸)

1G

Sigma-Aldrich





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